qfpcr检查是什么意思(qpcr是用来检测什么的)

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浅谈染色体非整体检测QF-PCR&MLPA

最近,MRC Holland 公司MLPA染色体非整体检测试剂盒获国内进口注册证。受专利限制,目前国内染色体非整体快速检测试剂盒只能采用有荧光PCR-毛细管电泳法(QF-PCR)技术。那么PCR-毛细管电泳法(QF-PCR)和多重连接探针扩增技术(MLPA)这两种 *** 各自的优劣势在哪里呢?

下面就用市面上已经使用的两种试剂盒为例进行对比。

1.上海晶准 21、18、13和性染色体倍型检测试剂盒(荧光PCR-毛细管电泳法)

2. MRC Holland 公司SALSA MLPAprobemix P095 Aneuploidy

一、 QF-PCR MLPA 共同点:

1. 目标染色体均为chr21、chr18、chr13以及性染色体X和Y。

2. 采用荧光多重PCR,对不同PCR产物长度差异进行电泳区分。

3. 采用仪器为PCR仪和基因分析仪,在国内很多医院均有配置。

二、 QF-PCR MLPA 差异:

下表中可见:MLPA虽然在探针数量上较QF-PCR多,但由于操作复杂,杂交、连接等导致误差放大,容易出现假阴性。MLPA判读 *** 为半定量方式,表现一定的局限性。MLPA的局限性表现在不能检出三倍体、不能检测母源污染(MCC),也不能对样本亲缘关系溯源,而这些QF-PCR均可以做到。

PCR检查是查什么的

PCR是现在实验室常用的技术手段之一。一般用于病原的检测,分子机制中各基因的检测以及遗传相关的检测。

感染性疾病

PCR在医学检验学中最有价值的应用领域就是对感染性疾病的诊断。理论上,只要样本有一个病原体存在,PCR就可以检测到。一般实验室也能检出10~100基因拷贝,而目前病原体抗原检测 *** 一般需要105-7个病原体才可检测到。PCR对病原体的检测解决了免疫学检测的“窗口期”问题,可判断疾病是否处于隐性或亚临床状态。

定量PCR研究资料已表明,病原体数量与感染性疾病病情的轻重程度、传染性及治疗效果均有相关性。许多研究表明,人类免疫缺陷病毒(HIV)感染后,潜伏期长短和临床症状轻重与血液中的病毒量显著相关;也有研究表明,HIV病毒载量低于一定值时,没有传染性。

在乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒定量研究中发现,病毒的数量与某些药物的疗效相关。例如,干扰素治疗对肝炎病毒高拷贝者不敏感,低拷贝者敏感;而有些药物则具有显著降低病毒高拷贝的作用。

肿瘤

癌基因的表达增加和突变,在许多肿瘤早期和良性的阶段就可出现。PCR技术不但能有效的检测基因的突变,而且能准确检测癌基因的表达量,可据此进行肿瘤早期诊断、分型、分期和预后判断。

几乎所有慢性骨髓性白血病患者都可检测到原癌基因易位导致的BCR/ABL融合基因形成,定量PCR技术可通过检测BCR/ABL融合基因的表达确定微量残余恶性细胞存在的数量,以此作为治疗效果和估计复发的危险性的依据。

一些病毒致癌作用也与病毒载量有关,EB病毒载量的FQ-PCR检测结果已被用于鼻咽癌早期发现和随访。

遗传病

PCR技术首次临床应用就是从检测镰状细胞和β-地中海贫血的基因突变开始的。基因的突变和缺失均会引起各种珠蛋白的表达不平衡,用FQ-PCR检测各种珠蛋白基因表达差异,是地中海贫血诊断的有效手段

检测染色体需要多少钱

费用大约是:一、周围血细胞染色体核型分析,约360元。二、染色体Y基因微缺失,约1500元人民币。三、流产组织微绒毛非整倍体染色体核型分析,约2100元。

检查染色体可通过传统的细胞核型分析、现代分子生物学技术、荧光原位杂交即FISH、定量荧光聚合酶链式反应即QF-PCR、比较基因组杂交aCGH、染色体的微阵列分析CMA、多重连接探针扩增技术MLPA以及二代测序等 *** 来进行检查。染色体的核型分析根据染色体的长度、着丝点的位置、臂比和随体等,借助染色体分带技术对被检者的染色体进行分析、比较、排序和编号,用于检查染色体有无数目和结构异常。FISH是被检测的染色体和靶DNA与所用的探针进行变性、退火、复性,形成一靶DNA和核酸探针的杂交体来进行检查的一种技术。QF-PCR即荧光定量PCR,采用多对荧光标记的引物对染色体特异的、多个短串联重复序列STR进行多重PCR扩增,然后用DNA自动序列分析仪对PCR产物进行片段分析,从而判断受检染色体的数目。其主要用于羊水和绒毛、产前诊断如21-三体、18-三体、13-三体等三种染色体数目异常的检测。染色体的微阵列也叫芯片,是在外周血、羊水绒毛和流产物等组织中提取DNA作为样本,检查全基因组染色体的变化。

可以检测常规染色体核型分析难以查出来的染色体的微缺失、微重复以及单亲二倍体和杂合性缺失等基因组失衡的现象,是目前国际上比较先进的细胞分子生物学诊断手段。2010年美国细胞遗传学会,推荐将CMA即染色体的芯片技术代替核型分析,作为不明原因的智力低下、多发畸形和孤独症疾病的首选诊断手段。目前具体选择哪种 *** 检查,需***医生根据患儿的临床表现、家族史等情况来判断决定。

PCR检查是什么检查

你好!PCR也叫聚合酶链反应,用作临床检查一般用来检测体内有无特定病原体感染、有无基因突变等情况。如果能在机体样本中扩增出相应条带,则表明有相应细菌或病毒感染,或有相应基因突变。如果没有,则表明没有感染或突变。因为机体正常情况下是不存在那种突变或细菌病毒的基因片段的,只有感染以后才能扩增出来。

什么是realtime PCR,什么是q-pcr,所用反应物质与普通PCR有何不同

实时定量pcr

(real-time

quantitative

pcr),简称real-time

pcr,q-pcr,q-rt-pcr等等,都是一个意思。普通pcr结果反映的其实是pcr的结果,而当pcr经过多伦循环到平台期后,很难反映原来模板的浓度;而实时定量pcr

反映的是pcr的过程,它起飞时间的ct值可以精确反映模板的浓度。定义,操作,原理什么的我就不说了,自己查百度百科和文库,我就从实战给你点注意事项吧。

1

选好内参基因,特别是同一物种不同组织中某基因的表达情况,一定要别人报道过在你检测的组织中变化不大,如果你只是拿一个别的物种中的同源基因,别人肯定会argue你的,如果有可能可以双内参。

2

更好有标准曲线,标曲反应扩增效率,这样比较准确点,不然只能用2

delta

delta

t法了,有些杂志扣的话,不太好解释。标曲可以用cdna来制备,还可以直接有已知模板来制(可以搜一下网上的标曲制备 *** )

3

结果先看融解曲线,如果只有特异的单一融解峰,再去分析数据,不然没有意义。

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